SIRT5活性检测试剂盒（荧光）

BB-491259
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  • 100T
价格
  • ¥3900元
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产品概述 product description

保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.微量试剂开盖前须离心！
2.开盖后组份按要求条件保存。
3.拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪
适用样本
细胞
仪器准备
1.荧光酶标仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用的黑色96孔板
使用注意事项
1.底物为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2.预实验需确定酶浓度（细胞数量）和孵育时间的线性区间，避免底物过度消耗或信号饱和。
.3. 37°C下反应如果颜色变化不明显，可以适当延长反应时间。
4. 如果样品中激活的SIRTS水平很低，适当调节诱导细胞的时间，找一个SIRT5激活比较强的时间点进行检测。
5.底物避光保存，使用过程中尽量避光。
6.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
7.荧光酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。由于该底物的激发波长在紫外区，普通透明孔板会产生较高的背景信号。使用黑色96孔板进行检测，显著降低背景干扰。
8.SIRT5的特异性抑制剂可以添加作为阴性对照。
使用方法
详见贝博试剂盒里的纸质说明书

酶活性计算
SIRT5活性可表示为每万细胞的相对荧光单位(RFU)、样品中每微克蛋白质的相对荧光单位(RFU)，或处理组样品相对于未处理对照组或阴性对照样品的 RFU倍数增加。
酶活性=F/C
F:荧光强度(RFU)
C:细胞数量
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